尊龙凯时-人生就是搏!



    

        

            
            

                
            

        

    

    

    

        


        
            
                AAV代碼
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                腺相關病毒代碼
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            CRISPR/Cas9
        

    







    

        
    





    

        
    



 


    

        


            

                

                    

                        
                        
                    

                

            


            
CRISPR/Cas9

            


                

	全國服務熱線400-151-5198      業務諮詢15800353038



CRISPR/Cas9 是一種能夠對基因組的特定位點進行精確編輯的技術。其原理是核酸內切酶Cas9蛋白通過導向性RNA（guide RNA, gRNA）識別特定基因組位點並對雙鏈DNA進行切割，造成DNA雙鏈斷裂，細胞利用非同源末端連接(Non homologous End Joining，NHEJ）或者同源重組（Homologous Recombination, HR）方式對切割位點進行修復，實現DNA水平基因敲除或精確編輯。

　　CRISPR/Cas9 系統主要由兩部分組成：

　　1. 單鏈的guide RNA（single-guide RNA，sgRNA）

　　2. 有核酸內切酶活性的Cas9 蛋白 

            

            

            

                
                

                    

	 CRISPR基因敲除



	

		　　以基因敲除為目的時，可以利用Cas9-sgRNA對DNA進行切割產生雙鏈斷裂，隨後細胞通過非同源末端連接方式修復DNA，在此過程中，將隨機引入鹼基的缺失或增加，基因發生移碼突變，導致編碼基因的敲除。　　






                

                

                    

	

		  CRISPR基因編輯　　

	

		　　以基因敲入或替換為目的時，需要藉助同源重組原理。CRISPR/Cas9系統中的Cas9-sgRNA在靶位點進行切割產生DNA雙鏈斷裂，在模板DNA存在時，細胞通過同源重組方式修復DNA，而模板DNA可以被人為設計成需要插入的基因或需要修復的基因，此時細胞編碼目的基因。






                

                

                    

	

		 載體的選擇（部分）





	　　提供病毒載體的含Cas9蛋白的單載和雙載系統，可根據目的基因序列設計多條gRNA，載體帶有多種熒光抗性標記，方便篩選。



	

		
			

				
					載體類別
				
					編號
				
					載體元件
			

			

				
					CRISPR慢病毒單載體
				
					H5070
				
					

						pLenti-U6-spgRNA v2.0-CMV-Puro-P2A-3xFLAG-spCas9-WPRE

						
			

			

				
					H7072
				
					

						pLenti-U6-spgRNA v2.0-CMV-BSR-P2A-3xFLAG-spCas9-WPRE

						
			

			

				
					H6825
				
					

						pLenti-U6-spgRNA v2.0-CMV-sfGFP-P2A-3xFLAG-spCas9-WPRE

						
			

			

				
					CRISPR慢病毒雙載體
				
					H5068
				
					

						pLenti-U6-spgRNA v2.0-CMV-EGFP-WPRE

						
			

			

				
					H5450
				
					

						pLenti-CMV-Puro-P2A-3xFLAG-espCas9_1.1-WPRE

						
			

			

				
					CRISPR  AAV單載體系統
				
					H6941
				
					

						pAAV-CMV-SaCas9-U6-sagRNA v2.0

						
			

			

				
					H5273
				
					

						pAAV-hSyn-SaCas9-U6-sagRNA v2.0

						
			

			

				
					CRISPR  AAV雙載體系統
				
					H6291
				
					

						pAAV-CMV-EGFP-WPRE-U6-spgRNA v2.0

						
			

			

				
					

						H12663

						
				
					

						pAAV-U6-shRNA/spgRNA v2.0-CMV-EGFP-WPRE

						
			

			

				
					

						H11012

						
				
					

						pAAV-CMV-Luc2-WPRE-U6-spgRNA

						
			

		
	






                

                

                    

	

		 病毒載體服務流程

		 




    
	
  • 
		物種及目的基因名稱
    
		病毒載體要求與選擇
    
		其它特殊需求
    • 
	
  • 
		Cas9病毒載體構建
    
		病毒包裝與純化
    
		滴度測定
    • 
	
  • 
		高滴度的病毒顆粒
    
		按合同提供對照病毒
    
		實驗報告
    • 



                

                

                    
                


            

            

                

                    

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